免疫显色试剂-ARExVisual® Poly-HRP羊抗鼠/兔二抗试剂
CAT.NO. : DD23
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产品名称
免疫显色试剂-ARExVisual Poly-HRP羊抗鼠/兔二抗试剂
包装规格
| 货号 | 型号 | 规格 |
|---|---|---|
| DD23 | 型号I | 200 测试、300 测试、600 测试、800 测试、900 测试 |
| DD23-2 | 型号II | 200 测试、300 测试、600 测试、800 测试、900 测试、500 人份、1000 人份 |
| DD23-3 | 型号III | 200 测试、300 测试、600 测试、800 测试、900 测试、10mL、30mL、100mL、153mL、500mL、1000mL |
| DD23-4 | 型号IV | 500 人份、1000 人份 |
| DD23-5 | 型号V | 500 人份、1000 人份 |
预期用途
在免疫组化反应中与首要抗原抗体结合,通过染色,将靶点进行标记。
检验原理
本品适用于石蜡切片组织标本进行染色。对石蜡包埋的组织进行脱蜡,热抗原修复以及染色等步骤,以此来观察组织形态和特征蛋白的分布。采用了最新的多聚技术,将酶连接到以多分枝结构的聚合物形成密集串式的结构,极大地提高了酶标的密度,对组织的固定方法和固定时间有更宽广的适应性,减少了因为组织收取和处理方法的不同所造成的差异性,具有简便、快速、灵敏、重复性好等特点。
主要组成成分
| 型号 | 组成成分 |
|---|---|
| 型号I | 样本释放剂、返蓝染色液、清洗液、聚合物(HRP 标记兔抗体)、阻断剂、DAB 染色液 A 液、DAB 染色液 B 液、苏木素染色液、免疫组化抗原修复缓冲液、内源性过氧化物酶阻断剂 |
| 型号II | 阻断剂、聚合物(HRP 标记兔抗体)、DAB 染色液 A 液、DAB 染色液 B 液、内源性过氧化物酶阻断剂 |
| 型号III | 阻断剂、聚合物(HRP 标记兔抗体) |
| 型号IV | 阻断剂、聚合物(HRP 标记兔抗体)、DAB 染色液 A 液、DAB 染色液 B 液 |
| 型号V | 阻断剂、聚合物(HRP 标记兔抗体)、DAB 染色液 A 液、DAB 染色液 B 液、内源性过氧化物酶阻断剂、苏木素染色液 |
纯化水、无水酒精与一抗试剂需自备。所有样品及试剂滴加、加热、排水、灌水等的动作均由仪器自动完成。
储存条件及有效期
(9 - 25)°C 储存有效期 6 个月或(2 - 8)°C 储存有效期 18 个月。
采用泡沫箱加冰袋密封的运输方式,时间不超过 7 天,开箱温度不超过 30°C,产品性能无影响。
采用泡沫箱加冰袋密封的运输方式,时间不超过 7 天,开箱温度不超过 30°C,产品性能无影响。
适用仪器
全自动免疫组化染色机
样本要求
本产品适用于按病理技术规范处理的 3 年内石蜡切片标本。 对于直径≥2cm 的标本应在术后每隔 1cm 予以切开,并在 30 分钟内使用中性甲醛溶液固定。固定时间以 8 - 24h 为宜,以保证后续的免疫组织化学检测得到良好结果。 组织切片厚度以 3 - 5μm 为宜,吸附在防脱玻片上。切片在 2 - 8°C 条件下可保存一年。
检验方法
型号 I、型号 II 和型号 III 上机检验方法如下:
所有免疫组化染色步骤(除特殊显示外)均在常温(15 - 30)°C 下进行。每步滴加试剂由仪器完成,试剂需要按试剂序号摆放在 Aliya 仪器上的位置。
- 使用软件按照染色方案设置染色程序,并打印标签;
- 在自动染色机上装入贴有条码标签的载玻片;
- 确认试验用试剂已放置在相应位置;
- 进入仪器操作软件进行操作设置;
- 运行,进行自动染色。
具体试验操作参见全自动免疫组化染色机操作手册。
型号 II、III、IV、V 手工检验方法如下:
- 石蜡切片脱蜡、水化。
- 3% H2O2孵育 5 分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。
- 根据每一种抗体的要求,对组织抗原进行相应的抗原修复处理。
- PBS 冲洗,3 分钟 ×3 次;甩去 PBS 液,滴加一抗工作液,湿盒中孵育 30 分钟(根据实验结果可适当延长孵育时间至 60 分钟或 4°C 过夜)。
- PBS 冲洗,3 分钟 ×3 次;甩去 PBS 液,滴加阻断剂,室温下孵育 20 分钟。
- PBS 冲洗,3 分钟 ×3 次;甩去 PBS 液,滴加聚合物,室温下孵育 20 - 30 分钟。
- PBS 冲洗,3 分钟 ×3 次;甩去 PBS 液,滴加 DAB 显色试剂显色;显色时间为 2 - 5 分钟,可在显微镜下观察显色情况。
- 自来水冲洗,苏木素复染,0.1% 盐酸酒精分化,流水冲洗,返蓝。
检验方法的局限性
- 1.免疫组化是一个多步骤的检测过程,包括选择合适的试剂;组织的采集、固定、处理、备片;解释染色结果,使用者都需要经过专业性的训练。
- 2.组织染色依赖于染色前的处理过程,不恰当的固定、冻融、洗、干、热、切片、或者被其他组织或液体污染就可能产生人为的假阴性结果。不一致的结果可能是由于固定和包埋方法的不同或者组织内在的不均一性造成的。
- 3.复染过度或不足可能会干扰结果的准确判断。
- 4.对于结果的临床解释需结合病人的临床表现、形态学和组织病理学的标准,并需要参考正确的阴性阳性对照。
- 5.在免疫组化测试中如果出现阴性结果,表示未检测出抗原,而不是经测定的细胞或者组织中不存在该抗原。
- 6.操作过程应保证充分的浸泡时间与次数,过程中避免切片干燥,否则可能会造成非特异着色。
- 7.此试剂是否用于非福尔马林固定组织还未得到证实。
注意事项
- 1.本品仅用于科学研究,不做其他用途。
- 2.应用适当的防护措施,以避免同皮肤和眼睛接触。
- 3.DAB有致敏作用,故操作时应戴手套,尽量避免与皮肤接触,用后及时彻底冲洗。显色剂含有 DAB,试剂瓶应保持密封,避免泄漏。如有泄漏,应戴手套进行处理,避免与皮肤直接接触。
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